目前啤酒中二氧化硫的檢測(cè)方法多種多樣,如:甲醛—碘量法、通氮蒸餾—滴定亞硫酸測(cè)定法、鹽酸副玫瑰苯胺比色法、化學(xué)分析儀流動(dòng)注射分析法及流通計(jì)時(shí)電位分析法等。啤酒風(fēng)味的變化主要是由于來(lái)自麥芽與麥汁的一些羰基化合物發(fā)酵時(shí)未得到充分還原而形成的，為此許多廠家為了保持風(fēng)味穩(wěn)定性，除在生產(chǎn)過(guò)程中盡量防止氧的攝入外，還采取在灌裝前添加抗氧化劑的方法，SO2即屬于此類(lèi)添加劑，它既是還原劑又是殺菌劑，由于它是屬于GRAS級(jí)的食品添加劑，安全而有效，在國(guó)外早已應(yīng)用于啤酒行業(yè)。
啤酒中的二氧化硫主要來(lái)自于兩個(gè)方面；一方面是啤酒釀造的原輔材料中，如啤酒花、輔料和麥芽等。另一方面是啤酒在發(fā)酵過(guò)程中酵母的代謝產(chǎn)生的二氧化硫。據(jù)相關(guān)資料顯示，原料中94% 的二氧化硫在麥汁煮沸中揮發(fā)掉，因而啤酒中的二氧化硫主要來(lái)自于酵母代謝?？梢哉J(rèn)為，10～15mg/L 的二氧化硫是酵母產(chǎn)生的。大量不確定的因素可以影響二氧化硫的含量，包括麥汁成分、發(fā)酵工藝條件、酵母菌株與生理狀況。麥汁中脂類(lèi)含量與溶解氧量直接影響二氧化硫含量。麥汁中脂類(lèi)含量增加，成品啤酒中二氧化硫含量急劇降低。而采用純氧充氧的麥汁發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的二氧化硫含量明顯降低。發(fā)酵工藝條件也影響著二氧化硫的含量，例如大量的文獻(xiàn)報(bào)道了發(fā)酵壓力與發(fā)酵溫度直接影響成品啤酒中二氧化硫含量。研究發(fā)現(xiàn)麥汁的添加方式對(duì)發(fā)酵產(chǎn)生的二氧化硫含量也有著重要的影響。采用生理活性較弱的酵母進(jìn)行接種發(fā)酵而產(chǎn)生的二氧化硫普遍低于正常發(fā)酵的情況。
1 直接碘量法
方法原理：啤酒中的SO2包括游離的和結(jié)合的，加入NaOH破壞其結(jié)合狀態(tài)并使之固定，再用碘標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定。
方法步驟：吸取氫氧化鈉溶液于碘量瓶中，再將樣品以吸管尖插入氫氧化鈉溶液的方式加入到碘量瓶中，搖勻，蓋塞。靜置一段時(shí)間后，再加入少量冰塊、淀粉指示劑、硫酸溶液，搖勻，用碘標(biāo)準(zhǔn)溶液迅速滴定至藍(lán)色，30s內(nèi)不變即為終點(diǎn)記下消耗碘標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。以水代替樣品做空白試驗(yàn)，操作同上。
誤差分析：由于樣品中含有其他還原性物質(zhì)，使測(cè)定值偏高。
優(yōu)點(diǎn)：無(wú)需蒸餾，只需滴定操作，檢測(cè)儀器簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間短、檢測(cè)步驟方便、檢測(cè)效率高，適用于大批量檢測(cè)。
缺點(diǎn):啤酒顏色影響滴定終點(diǎn)顏色的判定，肉眼分辨有影響。以水代替樣品做空白試驗(yàn)沒(méi)有考慮啤酒本底的影響。

2 甲醛—碘量法
直接碘量法對(duì)啤酒中二氧化硫含量的測(cè)定, 過(guò)程受其它還原性物質(zhì)的干擾, 造成測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度差，為了克服這個(gè)方面的缺點(diǎn)，李忠軍和汪德榮[14]兩位教授在2001年對(duì)直接碘量法進(jìn)行了改進(jìn)，并探討了不同環(huán)境下的佳分析條件。本法探討了用甲醛作掩蔽劑碘量法測(cè)定啤酒中殘留的二氧化硫，佳分析條件為: pH 為3～4，甲醛用量為SO2 含量的2～4倍，掩蔽時(shí)間為4min,溫度25～33℃，該法的檢出限為2×10- 5 g/kg，可滿(mǎn)足啤酒中二氧化硫的測(cè)定。
方法原理：二氧化硫在水溶液中主要以HSO3-及SO32-形式存在，我們?cè)隗w系中加入掩蔽劑甲醛后，由于甲醛的氧化作用，體系中沒(méi)有 存在，只有其它的還原性物質(zhì)或離子消耗碘標(biāo)準(zhǔn)溶液[9]。而碘量法不加掩蔽劑，直接用碘標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，溶液中HSO3-及其它還原性物質(zhì)和離子均消耗碘溶液，由兩次滴定之差就扣除了干擾離子的影響，從而測(cè)得實(shí)際二氧化硫的含量。
方法步驟：將啤酒及緩沖溶液置于碘量瓶中，加淀粉溶液，用碘標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液呈淡藍(lán)色30秒不變色為止，記錄體積V1；按同樣分析步驟，加入適量掩蔽劑，測(cè)干擾空白體積V2，V1-V2即為體系中HSO3-所消耗的碘標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，據(jù)此可計(jì)算出樣品中的二氧化硫。
誤差分析：與直接碘量法一樣，此法亦受酸堿性影響，堿性過(guò)大，由于堿與I2反應(yīng)生成IO- ，進(jìn)而自身歧化成IO3- 和I- ，多消耗碘液，使測(cè)定結(jié)果偏高；且在強(qiáng)堿性溶液中甲醛與二氧化硫的掩蔽產(chǎn)物分解，掩蔽失效亦引起結(jié)果偏高。
優(yōu)點(diǎn)：無(wú)需蒸餾，只需滴定操作，檢測(cè)儀器簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間短、檢測(cè)步驟方便、檢測(cè)效率高，適用于大批量檢測(cè)。消除了啤酒本底的影響。
缺點(diǎn)：啤酒顏色影響滴定終點(diǎn)顏色的判定，肉眼分辨有影響，控制條件太多。

3 鹽酸副玫瑰苯胺法
方法原理：啤酒中游離的SO2被四鈉吸收液吸收，生成穩(wěn)定的絡(luò)合物，再與甲醛和堿性品紅作用，經(jīng)分子重排生成紫紅色的絡(luò)合物[13]，這個(gè)紫紅色的深淺和SO2的濃度成正比，從而根據(jù)測(cè)定顏色來(lái)確定啤酒中SO2含量。
方法步驟：首先配制二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，以正己醇為消泡劑，向冷的未脫氣啤酒中加入6種不同濃度的二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)使用液(通過(guò)二氧化硫儲(chǔ)備液加入汞穩(wěn)定劑經(jīng)稀釋后配制)，再分別加入鹽酸副玫瑰苯胺溶液，旋轉(zhuǎn)混合后再加入甲醛溶液定容混勻。保溫一段時(shí)間后取出，以未加標(biāo)樣的顯色液作參比，于550nm測(cè)定吸光值，制作校準(zhǔn)曲線的回歸方程。以樣品空白作參比，同法測(cè)定樣品的吸光度，二氧化硫含量通過(guò)校準(zhǔn)曲線線性回歸方程計(jì)算求得。
誤差分析：測(cè)定樣品時(shí)，以標(biāo)準(zhǔn)的零管作參比液，未考慮啤酒樣品本底的影響，因此會(huì)導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏高。
優(yōu)點(diǎn): 操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，再現(xiàn)性好，為我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)GB／T5009．34規(guī)定的方法。
缺點(diǎn)：操作過(guò)程使用了有毒的四氯汞鈉溶液，易對(duì)環(huán)境造成汞污染；檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)；形成的絡(luò)合物易與試樣中干擾物質(zhì)反應(yīng)，進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；樣品自身顏色也會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果造成干擾。該法測(cè)得的是游離SO2與部分結(jié)合SO2 的總和。